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앰플재생법

동결건조 앰플재생법





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  • [그림1]

    - 앰플(Ampoule) 커터기 또는 유리 절단용 칼을 사용하여 앰플의 중간 부분에 약 5mm 흠(Scratch)을 냅니다.
      * 모든 실험은 크린벤치(Clean bench)에서 무균적으로 진행합니다.
      * 혐기성 균주는 가능한 한 모든 과정을 혐기 챔버(Chamber) 안에서 실시하여야 합니다.
      * 앰플커터기는 과학기기업체에서 구매할 수 있습니다.

  • [그림2]

    - 앰플 외부를 70% 알코올을 적신 거즈로 잘 닦은 후 남아 있는 수분과 알코올은 증발시켜 말립니다.

  • [그림3]

    - 실험자가 볼 때 앰플의 흠을 낸 면이 바깥쪽에 위치하도록 양손으로 앰플을 잡고, 힘을 주어 앰플을 절단합니다.

  • [그림4]

    - 절단된 앰플의 끝 부분을 화염멸균한 다음, 멸균증류수를 0.3~0.5 ml 첨가하여 골고루 현탁합니다.
      * Liquid-drying된 미생물의 경우는 Rehydration solution(KCTC Media No. 1443)을 0.3-0.5ml
       첨가하여 골고루 현탁합니다.

  • [그림5]

    - 현탁한 시료를 피펫(pipette)이나 백금이로 소량 채취하여 평판배지로 옮기고, 남은 시료는 멸균된 tube에 옮겨 접종된 균주의 성장이 확인될 때까지 4℃에 보관합니다.

  • [그림6]

    - 균체 현탁액을 KCTC가 추천한 평판배지에 접종하여 최적온도에서 배양한 후, 균주의 생육여부 및 다른 균주의 오염여부를 확인하고 순수 배양된 균주를 실험에 사용합니다.