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Korean Collection for Type Cultures
KCTC에서 제공하는 정보 및 문의 게시판 입니다.
QnA
| 답변 | |||
|---|---|---|---|
| 작성자 | thdus9851 | 조회수:770 | 2023-03-16 |
| 질문구분 | 질문 구분 | ********** | |
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안녕하세요.
생물자원센터입니다. Q: Microcytis aeruginosa을 분양 받을려고 하는데 배양 시 필요한 조건을 자세히 알고 싶어서 연락드립니다 ! A: Microcystis aeruginosa 배양 조건에 대한 정보입니다. 배양에 앞서, Microcystis aeruginosa 배양에 필요한 배지 정보를 보내드립니다. 배지는 BG-11 이라는 담수 배지로, Microcystis aeruginosa 배양에 널리 사용되는 배지 입니다. 배지 조성은 자원 수령 시 동봉된 분양 명세서에 작성되어 있습니다. 액체 배지 제조 방법은 trace metal mix A5 + Co 용액 성분을 제외한 나머지 성분들을 증류수에 녹인 후 pH를 7.0 ? 7.5로 조절하고 Autoclave를 이용하여 고압습윤멸균을 하신 후, trace metal mix A5 + Co 용액을 제조하여 실린지 필터 (pore size: 0.2 mm 추천)로 여과 멸균 후 첨가하시면 됩니다. 고체 배지의 경우, 고압습윤멸균 전 agar (1.5 ? 2.0%) 성분을 같이 넣어 멸균 후, trace metal mix A5 + Co 용액을 위 방법과 같이 첨가하여 제조하시면 됩니다. 미세조류 배양 시 중요한 요소는 빛, 탄소원 공급, 온도, pH 조절 등이 있습니다. 1. 먼저 빛의 경우, 초기 배양 시 약 5,000 ? 7,000 lux (형광등 사용 시 15 ? 25 cm 간격 정도)로 광도를 조절하여 공급하시다가 세포 농도가 높아지면 10,000 ? 20,000 lux로 공급해주시면 세포 배양에 좋습니다. 광원으로는 형광등이나 LED 모두 상관없으며, 만약 파장을 선택하실 수 있으실 경우에는 630 ? 670 nm의 파장 (red LED)으로 배양 하시면 세포 분열을 더 빨리 할 수 있으니 참고바랍니다. 2. 탄소원 공급은 공기 중에 존재하는 이산화탄소로도 배양이 가능하나, 추가적으로 이산화탄소 가스를 공급해 주는 것이 좋습니다. 이산화탄소를 공급해주면 미세조류가 광합성을 하는데 많은 도움이 되며, pH 유지에도 효과적이므로 공기와 혼합하여 1 ? 2% 이산화탄소 가스를 배양액 부피의 10% (0.1 vvm)로 공급해 주는 것을 추천드립니다. 3. 미세조류 배양의 최적 온도는 약 20 - 22도이며, 15도 이하 / 25도 이상으로만 온도 변화가 되지 않는다면 배양하는데 큰 문제는 없을 것입니다. 4. pH는 7.0 ? 8.0 사이로 유지하며 배양해 주시면 되는데, pH가 많이 높아질 경우 (pH>9.0) 세포 응집이 생겨 빛의 공급이 원활하지 않아 세포가 사멸하므로 pH는 가급적 7.0 ? 8.0 사이를 유지하며 배양하시면 될 것 같습니다. 마지막으로, 고농도로 배양을 하실 경우 추가적으로 질소원과 인원을 공급하여 배양하시는 방법을 추천드립니다. Microcystis aeruginosa 의 경우 가장 적절한 N:P 비율은 7:1로, N:P = 5 ? 10:1 수준으로 맞춰 공급하시면 고농도 배양도 가능할 것입니다. 질문해주신 내용에 대한 답변은 여기까지이며, 더 궁금한 사항이나 필요한 부분이 있으시면 김기현 선생님(063-570-5654, *****@*****)께 문의 주시기 바랍니다. 항상 저희 KCTC를 이용해주셔서 감사합니다. 안녕하세요 .<br><br>Microcytis aeruginosa을 분양 받을려고 하는데 <br><br>배양 시 필요한 조건을 자세히 알고 싶어서 연락드립니다 ! <br><br>확인부탁드립니다.<br><br>감사합니다. ------------------------------------------ 원문 ---------------------------- |
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