Korean Collection for Type Cultures

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L. murinus liquid culture 방법
작성자	kdw0808	조회수:63	2024-10-29
질문구분	Firmicutes	E-Mail	**********
안녕하세요. 다름이 아니라 제가 생물자원센터에서 최근에 L. murinus (KCTC 3546T)를 일반분양 받았는데, MRS media에 liquid culture하는 과정에서 어려움을 겪고 있어서 문의 드립니다. MRS agar plate에서는 균이 자라는데, colony picking해서 15mL conical tube 3개에 MRS broth 각각 7mL 정도만 넣어서 37도씨 인큐베이터에서 튜브 입구는 파라필름으로 감아서 막은 채로 shaking 없이 culture를 진행했습니다. (anaerobic chamber 등 anaerobic incubation을 진행할 수 있는 장비는 연구실에 구비되지 않았습니다.) colony를 single picking도 해봤고, seeding이 부족해서 문제인가 싶어서 여러 colony를 고추장 찍듯이 퍼서 liquid culture seeding으로 사용한 적도 있는데도, 3일이 지나도, 균이 거의 자라지 않습니다. (3-4일 liquid culture incubation 진행해도 마찬가지였습니다. OD 값을 따로 측정해보진 않았지만 확실히 0.5 미만인 거 같고, 튜브 아래에 가라앉아 있는 균도 거의 없었습니다. 흔들면 아지랑이 같이 보이는 균들은 극소량 있었던 것 같아요.) MRS broth는 condalab 걸로 분말을 3DW에 넣고 autoclave 돌려서 사용했습니다. MRS agar plate는 broth에 1.5% agar 분말 넣고 autoclave 돌려서 굳혀서 사용했습니다. 혹시 liquid culture하려면 어떻게 해야 할지 방법 또는 팁이 있으시면 공유 부탁 드릴 수 있을까요? 답장 부탁 드립니다. 감사합니다.

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