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Composition | capacity | unit | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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sea salt(SIGMA) | 35 | g | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Trace element solution (First dissolve nitrilotriacetic acid and adjust pH to 6.5 with KOH, then add minerals. Adjust final to pH 7.0 with KOH) | 10.0 | ml | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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L-cysteine | 1.0 | g | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Na-resazurin solution(0.1% w/v) | 0.5 | ml | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
yeast extract | 1.0 | g | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
D.W | 1.0 | L | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
NaHCO3 | 2.0 | g | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Vitamin solution | 10.0 | ml | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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D-glucose | 3.0 | g |
** ph : 7.2-7.5
** memo : Dissolve ingredients (except bicarbonate, glucose, vitamins), then sparge medium with 100% N2 for 30-45 min to make it anoxic. Dispense medium under same gas atmosphere into anoxic Hungate-type tubes or serum vials and autoclave at 115℃ for 25 min. After autoclaving add glucose, vitamins and sulfide from sterile anoxic stock solutions prepared under 100% N2 gas and bicarbonate from a sterile stock solution prepared under 100% N2. The vitamin solution should be sterilized by filtration. Adjust pH of the complete medium to 7.0-7.2, if necessary.
** additional actions :