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Composition | capacity | unit | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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CaCl2·2H2O | 0.140 | g | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
NH4Cl | 0.250 | g | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
K2HPO4 | 0.140 | g | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
MgCl2·6H2O | 4.000 | g | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Fe(NH4)2(SO4)2·6H2O solution (0.1% w/v) | 2.000 | ml | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
KCl | 0.34 | g | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
MgSO4·7H2O | 3.450 | g | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Na-acetate | 1.000 | g | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Yeast extract (Difco) | 2.000 | g | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
NaCl | 18.000 | g | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Trace elements (see below) | 10.000 | ml | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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Trypticase peptone(BD BBL) | 2.000 | g | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
NaHCO3 | 5.000 | g | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Resazurin (0.1% w/v) | 0.50 | ml | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Vitamin solution (see below) | 10.000 | ml | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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L-Cysteine-HCl·H2O | 0.500 | g | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Dissolve ingredients (except bicarbonate, vitamins, cysteine and sulfide), sparge medium with 80% H2 and 20% CO2 gas mixture for 30 ? 45 min to make it anoxic. Add and dissolve bicarbonate and adjust pH to 7.0, then dispense medium under 80% H2 and 20% CO2 gas atmosphere into anoxic Hungate-type tubes or serum vials and autoclave. After sterilization add cysteine and sulfide from sterile anoxic stock solutions autoclaved under 100% N2 gas. Vitamins are prepared under 100% N2 gas atmosphere and sterilized by filtration. Adjust pH of complete medium to 6.8 ? 7.0, if necessary. For incubation use sterile 80% H2 and 20% CO2 gas mixture at two atmospheres of pressure. Note: If the medium is being used without overpressure then adjust pH with a small amount of sterile anoxic 1 N HCl, if necessary. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Na2S·9H2O | 0.500 | g | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Distilled water | 1000.000 | ml |
** ph : 7.0
** memo : DSM 141 medium
** additional actions :